嘿！朋友们，相信你们都对浓缩胶比分离胶一定要大吗有一定的兴趣。不要着急，我会在这里与大家分享我的经验和知识，并尽可能地回答你们的疑问。废话不多说，咱们开始吧！
浓缩胶的作用原理
1、浓缩胶的作用是有堆积作用，凝胶浓度较小，孔径较大，把较稀的样品加在浓缩胶上，经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。当样品液和浓缩胶选pH8的TRIS/HCL缓冲液，电极液选TRIS/甘氨酸。电泳开始后，HCL解离成氯离子，甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。
2、浓缩胶的作用：有堆积作用，凝胶浓度较小，孔径较大，把较稀的样品加在浓缩胶上，经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带，在电泳的时候可以看到样品被压成一条线。分离胶的作用：有分离分子的作用，为电荷效用和分子筛效用。
3、浓缩胶导致蛋白质样本浓缩聚集的原理：浓缩胶的作用是有堆积作用，凝胶浓度较小，孔径较大，把较稀的样品加在浓缩胶上，经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。当样品液和浓缩胶选pH8的TRIS/HCL缓冲液，电极液选TRIS/甘氨酸。
4、其作用原理是在缓冲系统中的弱酸，如甘氨酸，在接近其pKa的pH值时，任何时候都只有一部分分子带负电。如样品和浓缩胶均用pH 7的Tris-HCI缓冲液，电极液用Tris-甘氨酸缓冲液。此时，甘氨酸很少解离，其有效泳动率很低，而氯离子却有很高的泳动率，蛋白质分子的泳动率介于氯离子和甘氨酸之间。
wb实验中,为什么浓缩胶和分离胶的电压不一致?同样的电压可以吗?
1、浓缩胶的目的使得loading的样品能够在同一条水平线上进入分离胶，如果电压太大前端的蛋白容易在后面的蛋白赶上来前进入分离胶。而在分离是理论上（实际上也是）小电压长时间分离的效果会更好，但是在操作过程中没有必要等那么长的时间，所以就用大电压快点跑。
2、一般浓缩胶为80V，这样可以达到较好的浓缩效果，当条带达到分离胶时，可以调到220V，这样时间快点，做Wb时蛋白降解较少。转膜时一般为100V，转膜时间要根据蛋白大小确定，130kD蛋白分子较大，最好时间长点，不过太长也不好，蛋白转透过膜的，大约要1个半小时吧。
3、在理论上来说最好是电压不一样，浓缩胶小一些一般是50~90V，分离胶大一些一般是120~200V 但是就实际操作来说，如果需要处理大量的SDS-PAGE，并不需要严格的控制电压。一般可以200V恒压直接跑完，实际效果并不会特别差。
聚丙烯酰胺凝胶电泳中分离胶和浓缩胶有何不同?
性质不同 浓缩胶：在不连续聚丙烯 酰胺凝胶电泳中，同一介质的凝胶浓度分为 两种，负极的加样侧一般浓度为2%5%。分离胶：不连续缓冲体系聚丙烯酰胺凝胶电泳中的一部分，其组成、缓冲液pH和凝胶孔径与浓缩凝胶不同。它具有分子筛效应的小孔径凝胶。
在浓缩胶与分离胶之间有pH的不连续性，这是为了控制慢离子的解离度，从而控制其有效迁移率。要求在样品胶和浓缩胶中，慢离子较所有被分离样品的有效迁移率低，以使样品夹在快、慢离子界面之间，使样品浓缩。而在分离胶中慢离子的有效迁移率比所有样品的有效迁移率高，使样品不再受离子界面的影响。
减小离子在移动时的阻力。浓缩胶浓度低，孔径大，因此浓缩胶可以减小离子在移动时的阻力。可以堆积在一起。浓缩胶具有堆积作用，可以把较稀的样品加在浓缩胶上，经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带中。提高电泳的准确度。
浓缩胶的作用：浓缩胶有堆积作用。带电荷的蛋白质或核酸离子在大孔径胶中移动时阻力小，移动速度快，当接近小孔径的分离胶时，遇到的阻力大，移动速度减慢而使样品浓缩，形成一条狭窄区带，以减少电泳过程中的谱带扩散。
对。浓缩胶是加成了分离胶。浓缩胶是在不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中，同一介质的凝胶浓度分为两种，负极的加样侧一般浓度为2%？5%，称为浓缩胶，其余部分浓度为6%？8%，称为分离胶。由于浓缩胶浓度低、孔径大，而分离胶浓度高、孔径小。
我的一点感受，浓缩胶和分离胶的PH值不同，前者主要表现为浓缩效用，后者表现为电荷效用和分子筛效用。浓缩效应主要在浓缩胶中完成，浓缩胶的pH8，在这个pH条件下，缓冲液中的HCl的Cl离子几乎全部解离，Gly的等电点为0，仅少数解离为负离子，在电场中移动速度很慢。
浓缩胶太短有影响吗
会有影响的。 分离胶少了浓缩胶多了也就是说蛋白分离的过程会缩短。虽然胶浓度不会改变，但是跑出来的比例会比正常的胶要缩小一些。就像正常的屏幕换成宽屏的感觉。
分离胶的距离就会太短，结果会导致蛋白无法充分分离开来。浓缩胶是在不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中，同一介质的凝胶浓度分为两种，负极的加样侧一般浓度为2%5%，称为浓缩胶。
http：//liufengsong.blog.16com/blog/static/3153036520098185460881/这里介绍了G250和R250的区别。试剂和染料时间久一点没什么关系，缓冲液1－2星期重新配制一次，否则tris缓冲液PH值容易变化，会对跑胶结果有影响，具体还有什么问题可以再讨论，因为你给的信息比较少不好做分析。
感谢各位看客，文章到此结束，希望可以帮助到大家。
